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illumina MiniSeq基因測序 病毒檢測試劑
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產(chǎn)品名稱:Miniseq High Output Reagent Kit(300-cycles)基因測序試劑盒
產(chǎn)品貨號:FC-420-1003
產(chǎn)品規(guī)格:
大輸出 7.5 Gb(MiniSeq High Output Reagent Kit (300-cycles))
每次運(yùn)行的大讀數(shù) 高達(dá)2500萬
試劑類型 簇生成,配對末端測序,合成測序
核酸類型 DNA,RNA
系統(tǒng)兼容性 MiniSeq
技術(shù) 測序
產(chǎn)品介紹:
-illumina測序原理步驟:一、sample prep(樣本準(zhǔn)備):基因文庫制備(一個(gè)基因組切斷再加接頭)二、cluster generaton(簇的形成):文庫在測序芯片(流動池flowcell)上不斷擴(kuò)增,形成橋式PCR,再切掉反向鏈(reverse strand),形成許多簇相同的正向序列(正向鏈forward strand)。Snipaste_2019-02-08_21-42-31.png image.png
三、sequencing(測序):熒光信號、可逆阻斷終止技術(shù)、Sequences-by-Synthesis
四、data analysis(數(shù)據(jù)分析)具體內(nèi)容:
測序芯片:
Snipaste_2019-02-06_11-40-11.png
形成簇之后,加入帶不同熒光標(biāo)記的dNTP(含有疊氮基團(tuán))和聚合酶,使得帶熒光標(biāo)記的dNTP結(jié)合到測序鏈上,再進(jìn)行激光掃描,得到熒光,推出結(jié)果。堿基結(jié)合到測序鏈并發(fā)出熒光信號的過程被稱為Sequences-by-Synthesis。
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image.png 由于疊氮基團(tuán)的存在(可逆阻斷終止技術(shù)),一個(gè)循環(huán)只能延長一個(gè)堿基,即一個(gè)堿基結(jié)合到測序鏈上為一個(gè)循環(huán),當(dāng)結(jié)合上一個(gè)堿基后,把其他dNTP和酶用水沖掉,然后進(jìn)行激光掃描,根據(jù)激光掃描顏色判斷是哪個(gè)堿基,根據(jù)互補(bǔ)原則反推出結(jié)果,再切掉疊氮基團(tuán),進(jìn)入新的循環(huán),加入新的dNTP和酶,再延長堿基,沖掉dNTP和酶,再激光掃描。讀取index(Barcode): 和讀取測序鏈一樣的原理,讀取的目的是為了確定樣本的來源。
產(chǎn)品名稱:illumina MiniSeq基因測序 病毒檢測試劑 產(chǎn)品貨號:FC-420-1003
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基因測序是一種新型基因檢測技術(shù),能夠從血液或唾液中分析測定基因全序列,預(yù)測罹患多種疾病的可能性,個(gè)體的行為特征及行為合理?;驕y序技術(shù)能鎖定個(gè)人病變基因,提前預(yù)防和治療。
基因測序相關(guān)產(chǎn)品和技術(shù)已由實(shí)驗(yàn)室研究演變到臨床使用,可以說基因測序技術(shù),是下一個(gè)改變世界的技術(shù) 。
基因測序只是基因檢測的方法之一,其又叫基因譜測序,是上*的一種基因檢測標(biāo)準(zhǔn)。
基因測序廣為人知的還有針對唐氏綜合征篩查的無創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測。只需要采集孕婦的外周血,通過對血液中游離DNA(包括胎兒游離DNA)進(jìn)行測序,并將測序結(jié)果進(jìn)行生物學(xué)分析,從而得出胎兒是否患有染色體數(shù)目異常的疾病,包括常見的21-三體綜合征(唐氏綜合征)、18-三體綜合征(愛德華氏綜合征)和13-三體綜合征(Patau綜合征)。
cDNA文庫顯然比基因組DNA文庫小得多,能夠比較容易從中篩選克隆得到細(xì)胞特異表達(dá)的基因。但對真核細(xì)胞來說,從基因組DNA文庫獲得的基因與從cDNA文庫獲得的不同,基因組DNA文庫所含的是帶有內(nèi)含子和外顯子的基因組基因,而從cDNA文庫中獲得的是已經(jīng)過剪接、去除了內(nèi)含子的cDNA。
真核生物基因組DNA十分龐大,其復(fù)雜程度是蛋白質(zhì)和mRNA的100倍左右,而且含有大量的重復(fù)序列. 采用電泳分離和雜交的方法,都難以直接分離到目的基因.這是從染色體DNA為出發(fā)材料直接克隆目的基因的一個(gè)主要困難。
高等生物一般具有10^5種左右不同的基因,但在一定時(shí)間階段的單個(gè)細(xì)胞或個(gè)體中,都僅有15%左右的基因得以表達(dá),產(chǎn)生約15000種不同的mRNA分子.可見,由mRNA出發(fā)的cDNA克隆,其復(fù)雜程度要比直接從基因組克隆簡單得多。
cDNA文庫在研究具體某類特定細(xì)胞中基因組的表達(dá)狀態(tài)及表達(dá)基因的功能鑒定方便具有特殊的優(yōu)勢,從而使它在個(gè)體發(fā)育、細(xì)胞分化、細(xì)胞周期調(diào)控、細(xì)胞衰老和死亡調(diào)控等生命現(xiàn)象的研究中具有更為廣泛的應(yīng)用價(jià)值,是研究工作中zui常使用到的基因文庫。
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