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illumina MiniSeq病毒基因測序試劑盒
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產(chǎn)品名稱:Miniseq High Output Reagent Kit(300-cycles)基因測序試劑盒
產(chǎn)品貨號:FC-420-1003
產(chǎn)品規(guī)格:
大輸出 7.5 Gb(MiniSeq High Output Reagent Kit (300-cycles))
每次運行的大讀數(shù) 高達2500萬
試劑類型 簇生成,配對末端測序,合成測序
核酸類型 DNA,RNA
系統(tǒng)兼容性 MiniSeq
技術(shù) 測序
產(chǎn)品介紹:
-illumina測序原理步驟:一、sample prep(樣本準備):基因文庫制備(一個基因組切斷再加接頭)二、cluster generaton(簇的形成):文庫在測序芯片(流動池flowcell)上不斷擴增,形成橋式PCR,再切掉反向鏈(reverse strand),形成許多簇相同的正向序列(正向鏈forward strand)。Snipaste_2019-02-08_21-42-31.png image.png
三、sequencing(測序):熒光信號、可逆阻斷終止技術(shù)、Sequences-by-Synthesis
四、data analysis(數(shù)據(jù)分析)具體內(nèi)容:
一、基因文庫:
image.png 接頭不僅含有與測序芯片上互補的序列,有時還有index序列,由于測序芯片的強大,一個芯片可以同時測許多樣本(動物、植物、微生物),那如何區(qū)分測序數(shù)據(jù)來自哪個樣本呢?加標簽即加index序列,從而來區(qū)分不同的樣本。
二、橋式PCR:文庫種到測序芯片,并進行擴增的過程。
測序芯片:
Snipaste_2019-02-06_11-40-11.png
圖片發(fā)自簡書App 形成簇之后,加入帶不同熒光標記的dNTP(含有疊氮基團)和聚合酶,使得帶熒光標記的dNTP結(jié)合到測序鏈上,再進行激光掃描,得到熒光,推出結(jié)果。堿基結(jié)合到測序鏈并發(fā)出熒光信號的過程被稱為Sequences-by-Synthesis。
image.png
image.png 由于疊氮基團的存在(可逆阻斷終止技術(shù)),一個循環(huán)只能延長一個堿基,即一個堿基結(jié)合到測序鏈上為一個循環(huán),當結(jié)合上一個堿基后,把其他dNTP和酶用水沖掉,然后進行激光掃描,根據(jù)激光掃描顏色判斷是哪個堿基,根據(jù)互補原則反推出結(jié)果,再切掉疊氮基團,進入新的循環(huán),加入新的dNTP和酶,再延長堿基,沖掉dNTP和酶,再激光掃描。讀取index(Barcode): 和讀取測序鏈一樣的原理,讀取的目的是為了確定樣本的來源。
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基因測序是一種新型基因檢測技術(shù),能夠從血液或唾液中分析測定基因全序列,預(yù)測罹患多種疾病的可能性,個體的行為特征及行為合理?;驕y序技術(shù)能鎖定個人病變基因,提前預(yù)防和治療。
基因測序相關(guān)產(chǎn)品和技術(shù)已由實驗室研究演變到臨床使用,可以說基因測序技術(shù),是下一個改變世界的技術(shù) 。
基因測序只是基因檢測的方法之一,其又叫基因譜測序,是上*的一種基因檢測標準。
基因測序廣為人知的還有針對唐氏綜合征篩查的無創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測。只需要采集孕婦的外周血,通過對血液中游離DNA(包括胎兒游離DNA)進行測序,并將測序結(jié)果進行生物學(xué)分析,從而得出胎兒是否患有染色體數(shù)目異常的疾病,包括常見的21-三體綜合征(唐氏綜合征)、18-三體綜合征(愛德華氏綜合征)和13-三體綜合征(Patau綜合征)。
cDNA文庫顯然比基因組DNA文庫小得多,能夠比較容易從中篩選克隆得到細胞特異表達的基因。但對真核細胞來說,從基因組DNA文庫獲得的基因與從cDNA文庫獲得的不同,基因組DNA文庫所含的是帶有內(nèi)含子和外顯子的基因組基因,而從cDNA文庫中獲得的是已經(jīng)過剪接、去除了內(nèi)含子的cDNA。
真核生物基因組DNA十分龐大,其復(fù)雜程度是蛋白質(zhì)和mRNA的100倍左右,而且含有大量的重復(fù)序列. 采用電泳分離和雜交的方法,都難以直接分離到目的基因.這是從染色體DNA為出發(fā)材料直接克隆目的基因的一個主要困難。
高等生物一般具有10^5種左右不同的基因,但在一定時間階段的單個細胞或個體中,都僅有15%左右的基因得以表達,產(chǎn)生約15000種不同的mRNA分子.可見,由mRNA出發(fā)的cDNA克隆,其復(fù)雜程度要比直接從基因組克隆簡單得多。
cDNA文庫在研究具體某類特定細胞中基因組的表達狀態(tài)及表達基因的功能鑒定方便具有特殊的優(yōu)勢,從而使它在個體發(fā)育、細胞分化、細胞周期調(diào)控、細胞衰老和死亡調(diào)控等生命現(xiàn)象的研究中具有更為廣泛的應(yīng)用價值,是研究工作中zui常使用到的基因文庫。
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紅榮微再(上海)生物工程技術(shù)有限公司主營:干細胞、精準醫(yī)療、細胞治療、器官再生 四大板塊的產(chǎn)品,以“傳遞科學(xué)價值,服務(wù)科學(xué)研究”為宗旨,經(jīng)過近兩年的努力推廣,紅榮微再(上海)生物工程技術(shù)有限公司在全中國代理的CellArtis干細胞產(chǎn)品已經(jīng)成功銷往:上海市、北京市、重慶市、天津市、廣東省的廣州市、深圳市、珠海市、江西省的南昌市、四川省的成都市、綿陽、浙江省的杭州市、寧波、溫州、江蘇省的南京市、蘇州、無錫、泰州、湖南省的長沙、陜西省的西安市、楊凌、甘肅省的蘭州、寧夏的銀川、新疆的烏魯木齊、廣西省的南寧市、山東省的濟南、青島、東北三省 遼寧省的沈陽市、大連市、吉林省的長春市、黑龍江省的哈爾濱市等中國絕大部分省市和自治區(qū)。
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