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康為世紀 柱式基因組DNA提取試劑盒
產(chǎn)品名稱:康為世紀 柱式基因組DNA提取試劑盒產(chǎn)品貨號:CW2298M英文名稱:Universal Genomic DNA Kit 產(chǎn)品規(guī)格:200 preps
產(chǎn)品介紹:
本試劑盒適合于從新鮮或冷凍的動物組織、細胞、血液、細菌等多種樣品中提取高純度總DNA。本品可純化獲得分子量最大為50 kb的核酸片段,純化過程不需使用苯酚或氯仿等有毒溶劑,無需乙醇沉淀。本試劑盒采用優(yōu)化的緩沖體系使裂解液中的DNA高效特異的結合到硅基質離心吸附柱上,PCR和其他酶促反應的抑制劑可通過兩步洗滌步驟被有效去除,最后使用低鹽緩沖液或水洗脫,即可得到高純度DNA。純化得到的DNA可以直接用于酶切、PCR、Real-Time PCR、文庫構建、Southern Blot、分子標記等下游實驗。
產(chǎn)品名稱:康為世紀 柱式基因組DNA提取試劑盒
產(chǎn)品貨號:CW2298M
產(chǎn)品組份:
自備試劑:
無水乙醇
Enzymatic Lysis Buffer(提取革蘭氏陽性菌基因組DNA時須準備)。
Enzymatic Lysis Buffe配方:20 mM Tris,pH8.0;2 mM Na2-EDTA;1.2% Triton
X-100;終濃度為20 mg/ml的Lysozyme(溶菌酶)。
產(chǎn)品特點:
●簡單方便:提取速度快,僅需40分鐘即可完成基因組DNA提取。
●高純度:純化得到的DNA ODSen.s.比值在1.7-1.9之間,完整度高(>15 kb),可用于二代測序、定量PCR、芯片檢測等下游實驗。
●高通量:可與液體工作站、磁珠法自動純化系統(tǒng)匹配使用。
實驗前準備及重要注意事項:
1.向Proteinase K中加入用量的Proteinase K Storage Buffer使其溶解,-20℃保存。配制好的Proteinase K勿長時間室溫放置,避免反復凍融,以免影響其活性。
2.樣品應避免反復凍融,否則會導致提取的核酸片段較小且提取量下降。
3.如果提取次生代謝產(chǎn)物大量積累或細胞壁厚的細菌培養(yǎng)物的基因組,建議在對數(shù)生長期早期收集樣品。
4.第一次使用前應按試劑瓶標簽的說明在Buffer GW1和Buffer GW2中加入無水乙醇。
5.使用前請檢查Buffer GTL和Buffer GL是否出現(xiàn)結晶或者沉淀,如有結晶或者沉淀,請將Buffer GL和Buffer GTL于56℃水浴重新溶解。
6.如果下游實驗對RNA污染比較敏感,可以在加入Buffer GL前加入4 μl DNase-Free的RNase A(100 mg/ml)
操作步驟:
血液及細胞樣本基因組提取
1.材料處理
1a. 如果提取材料為哺乳動物抗凝血液(無核紅細胞),可直接向50-200 μl新鮮或冷凍的抗凝血液樣品中加入Buffer GTL補足至200 μl;
1b. 如果提取材料為禽類、鳥類、兩棲類或更低級生物的抗凝血液,其紅細胞為有核細胞,取5-10 μl新鮮或冷凍的抗凝血液樣品,加入Buffer GTL補足至200 μl;
1c.貼壁培養(yǎng)的細胞應先處理為細胞懸液(最大提取量為5×106個細胞),2,000rpm(400×g)離心5分鐘,棄盡上清,加200 μl GTL,振蕩至樣品*懸??;
2.加入20 μl Proteinase K。
3.加入200 μl Buffer GL,渦旋震蕩充分混勻,56℃水浴10分鐘。
4.短暫離心以去除管蓋內(nèi)壁的水珠。加入200 μl無水乙醇,渦旋震蕩充分混勻。短暫離心。
5.上一個步驟中所得溶液全部加入到已裝入收集管的吸附柱(Spin Columns DM)中,若一次不能加完溶液,可分多次轉入。12,000 rpm(~13,400 ×g) 離心1分鐘,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管中。
6.向吸附柱中加入500 μl Buffer GW1(使用前檢查是否已加入無水乙醇),12,000 rp離心1分鐘,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管中。
7.向吸附柱中加入500 μl Buffer GW2(使用前檢查是否已加入無水乙醇),12,000 rpm離心1分鐘,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管中。
8.12,000 rpm離心2分鐘,倒掉收集管中廢液。將吸附柱置于室溫數(shù)分鐘,以*晾干。
9.將吸附柱置于一個新的離心管(自備)中,向吸附柱的中間部位懸空加入50-200 μlBuffer GE或滅菌水,室溫放置2-5分鐘,12,000 rpm離心1分鐘,收集DNA溶液,-20℃保存DNA。
保存條件:室溫(15-30℃)
產(chǎn)品訂購信息:
品牌 貨號 名稱 規(guī)格
康為世紀 CW2298M Universal Genomic DNA Kit 200preps
產(chǎn)品名稱:康為世紀 柱式基因組DNA提取試劑盒
產(chǎn)品貨號:CW2298M
關于公司:
康為世紀是主要從事高附加值、高技術含量的生物試劑的研發(fā)與生產(chǎn),為生命科學研究、基因檢測和體外診斷用戶提供創(chuàng)新型生物產(chǎn)品和服務??禐槭兰o建立了專業(yè)化、集約化、能夠形成自主知識產(chǎn)權的技術創(chuàng)新體系和開放式的合作創(chuàng)新平臺,構建成了公司完整的研發(fā)創(chuàng)新體系。產(chǎn)品線主要包括分子診斷原料酶、核酸采集與保護劑、核酸提取試劑盒、分子診斷檢測試劑等,打破了中國生物研究與產(chǎn)業(yè)對進口試劑的依賴。
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紅榮微再作為RNA、NGS、ctDNA、qPCR的分子診斷專業(yè)供應商,以“傳遞科學價值,服務科學研究"為宗旨,努力為客戶提供質量可靠、貨美價優(yōu)的分子診斷試劑耗材,與客戶攜手為中國分子診斷的發(fā)展而前行。