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康為世紀(jì) UltraSYBR Low ROX qPCR預(yù)混試劑
產(chǎn)品名稱:康為世紀(jì) UltraSYBR Low ROX qPCR預(yù)混試劑產(chǎn)品貨號(hào):CW2601H英文名稱:UltraSYBR Mixture(Low ROX)產(chǎn)品規(guī)格:40mL
產(chǎn)品介紹:
UltraSYBR Mixture(Low ROX)是專用于染料法(SYBR Green I)實(shí)時(shí)熒光定量PCR的預(yù)混體系,濃度為2×,包含 GoldStar Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、SYBR Green I 熒光染料和Mg2+和Low ROX校正染料,操作簡(jiǎn)單方便。主要用于基因組DNA靶序列和RNA反轉(zhuǎn)錄后cDNA靶序列的檢測(cè)。
本品所含的熒光染料SYBR Green I可以與所有的雙鏈DNA結(jié)合,使該產(chǎn)品可用于不同靶序列的檢測(cè)而不需合成特異性標(biāo)記探針。本品含有的GoldStar Taq DNA Polymerase是一種經(jīng)化學(xué)修飾的、全新高效熱啟動(dòng)酶,在常溫下沒有聚合酶活性,有效避免在常溫條件下由引物和模板非特異性結(jié)合或引物二聚體而產(chǎn)生的非特異性擴(kuò)增,酶的激活須在95℃下孵育10分鐘。*的PCR緩沖體系與熱啟動(dòng)酶的組合,有效抑制了非特異性的PCR擴(kuò)增,顯著提高了PCR的擴(kuò)增效率
產(chǎn)品名稱:康為世紀(jì) UltraSYBR Low ROX qPCR預(yù)混試劑
產(chǎn)品貨號(hào):CW2601H
產(chǎn)品組份:
推薦PCR反應(yīng)體系:
實(shí)驗(yàn)優(yōu)化方案:
在熒光定量反應(yīng)條件優(yōu)化時(shí),應(yīng)從引物濃度、退火溫度、延伸時(shí)間等方面進(jìn)行考慮,
以提高反應(yīng)特異性和擴(kuò)增效率。
1.反應(yīng)特異性和擴(kuò)增效率高的實(shí)驗(yàn)體系應(yīng)具備以下條件:
1)反應(yīng)特異性高:陰性對(duì)照無引物二聚體等非特異性擴(kuò)增;不產(chǎn)生目的片段以外擴(kuò)增。
2)擴(kuò)增效率高:Ct值低;PCR擴(kuò)增效率高,接近理論值100%。
2.反應(yīng)條件優(yōu)化方法:
1)引物濃度:通常引物濃度以0.2 μM可得到較好結(jié)果,可以終濃度0.1-1.0 μM作為設(shè)定范圍的參考。若提高反應(yīng)特異性,可降低引物濃度;若提高擴(kuò)增效率,可增加引
物的濃度,由此優(yōu)化反應(yīng)體系。
2)退火溫度:建議采用兩步法PCR,退火溫度60℃進(jìn)行反應(yīng)。若提高反應(yīng)特異性,可提高退火溫度,以60-64℃作為設(shè)定范圍的參考。若因使用Tm值較低的引物等原因,得不到良好的實(shí)驗(yàn)結(jié)果時(shí),可嘗試進(jìn)行三步法PCR擴(kuò)增,三步法的退火溫度請(qǐng)以56℃-64℃的范圍作為設(shè)定參考。
3)延伸時(shí)間:建議采用兩步法PCR,延伸時(shí)間1 min進(jìn)行反應(yīng)。若提高擴(kuò)增效率,可嘗試將延伸時(shí)間增加,或嘗試三步法PCR。
使用注意:
1.使用前請(qǐng)上下顛倒輕輕混勻,盡量避免起泡,并經(jīng)短暫離心后使用。
2.本產(chǎn)品中含有SYBR Green I熒光染料和ROX染料,保存本產(chǎn)品或配制PCR反應(yīng)液
時(shí)應(yīng)避免強(qiáng)光照射。
3.避免反復(fù)凍融本品,反復(fù)凍融可能使產(chǎn)品性能下降。
4.本品不能用于探針法熒光定量PCR。
5.配制反應(yīng)液時(shí),請(qǐng)使用新的或者無污染的槍頭和離心管,盡量防止污染。
6. 本產(chǎn)品預(yù)變性反應(yīng)必須在95℃ 10分鐘下完成!
儲(chǔ)存與運(yùn)輸:
-20℃,如需頻繁使用,可存放于2-8℃,盡量避免反復(fù)凍融
產(chǎn)品訂購(gòu)信息:
品牌 貨號(hào) 名稱 規(guī)格
康為世紀(jì) CW2601S UltraSYBR Mixture(Low ROX) 1 ml
康為世紀(jì) CW2601M UltraSYBR Mixture(Low ROX) 5 ml
康為世紀(jì) CW2601H UltraSYBR Mixture(Low ROX) 40ml
產(chǎn)品名稱:康為世紀(jì) UltraSYBR Low ROX qPCR預(yù)混試劑
產(chǎn)品貨號(hào):CW2601H
關(guān)于公司:
康為世紀(jì)生物科技股份有限公司是一家立足于生命科學(xué)領(lǐng)域,有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的國(guó)家優(yōu)良企業(yè),主要從事高附加值、高技術(shù)含量的生物試劑的研發(fā)與生產(chǎn),為生命科學(xué)研究、基因檢測(cè)和體外診斷用戶提供創(chuàng)新型生物產(chǎn)品和服務(wù)。公司曾先后被評(píng)為國(guó)家優(yōu)良企業(yè)、江蘇省科技型中小企業(yè)、江蘇省瞪羚企業(yè)、江蘇省民營(yíng)科技企業(yè)。公司建立了專業(yè)化、集約化、能夠形成自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的技術(shù)創(chuàng)新體系和開放式的合作創(chuàng)新平臺(tái),構(gòu)建成了公司完整的研發(fā)創(chuàng)新體系。
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