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紅榮微再 HS Probe qPCR預(yù)混試劑
產(chǎn)品名稱:紅榮微再 HS Probe qPCR預(yù)混試劑產(chǎn)品貨號(hào):RF-Q3001英文名稱:HS Probe qPCR Mix產(chǎn)品規(guī)格:1 mL, 20 μl × 100 rnxs
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
HS Probe qPCR預(yù)混試劑是一款適用于探針法的Real time PCR(qPCR)反應(yīng)的通用試劑。包含了除模板,引物,探針外所有的組分。優(yōu)選的熱啟動(dòng)Taq DNA polymerase,配合針對(duì)低拷貝模板而優(yōu)化的緩沖液,可以有效抑制非特異性擴(kuò)增,大大增加qPCR擴(kuò)增效率以及檢測(cè)靈敏度,適用于進(jìn)行高靈敏度的qPCR反應(yīng)。參比染料rox隨試劑盒提供。
本產(chǎn)品使用前只需要加入引物、模板、探針、ROX(根據(jù)使用的機(jī)型而定)、水;利用本產(chǎn)品可在廣泛的定量區(qū)域內(nèi)得到良好的標(biāo)準(zhǔn)曲線,對(duì)靶基因進(jìn)行準(zhǔn)確的定量、定性和SNP檢測(cè),具有重復(fù)性好、可信度高、并兼容各種不同類型的qPCR探針的特點(diǎn)。
產(chǎn)品名稱:紅榮微再 HS Probe qPCR預(yù)混試劑
產(chǎn)品貨號(hào):RF-Q3001
產(chǎn)品應(yīng)用:
基因表達(dá)分析
• 地拷貝基因檢測(cè)
• SNP和等位基因分型
• 測(cè)序和微陣列結(jié)果的驗(yàn)證
儲(chǔ)存與運(yùn)輸:
1. 冰上運(yùn)輸
2. 到貨后-20℃恒溫冷凍冰箱避光保存。
常用Q&A:
Q: 擴(kuò)增曲線異常
1、擴(kuò)增曲線不光滑:
系統(tǒng)需要校正,提高模板濃度;
ROX 使用錯(cuò)誤,更換正確的ROX 類型。
2、擴(kuò)增曲線斷裂或下滑:
模板濃度高,提高閾值并重新分析數(shù)據(jù);
降低模板濃度。
3、個(gè)別擴(kuò)增曲線驟降:
反應(yīng)管有氣泡。處理樣本時(shí)注意離心。
Q:反應(yīng)結(jié)束無擴(kuò)增曲線
1、循環(huán)數(shù)不夠:一般設(shè)40 個(gè)循環(huán),但要注意過多循環(huán)數(shù)增加背景信號(hào),降低數(shù)據(jù)可信度。
2、確認(rèn)程序中是否設(shè)置信號(hào)采集:兩步法的擴(kuò)增程序一般在退火/延伸階段采集信號(hào);三步法擴(kuò)增信
號(hào)采集設(shè)置在延伸階段。
3、引物降解:PAGE 檢測(cè)排除其降解的可能性。
4、模板濃度太低:減少稀釋度重復(fù)實(shí)驗(yàn),先從高濃度做起。
5、模板降解:重新制備模板。
Q: Ct 值太高
1、擴(kuò)增效率低:優(yōu)化反應(yīng)條件,嘗試三步法擴(kuò)增,或重新設(shè)計(jì)合成引物。
2、模板濃度低:減少稀釋度,先從高濃度做起。
3、模板降解:重新制備模板。
4、PCR 產(chǎn)物太長:推薦 PCR 產(chǎn)物長度 80-150 bp。
5、存在 PCR 抑制劑:若為模板帶入,加大模板稀釋倍數(shù)或重新制備模板。
Q:陰性對(duì)照出現(xiàn)明顯擴(kuò)增
1、反應(yīng)體系污染:更換新的Mix、水、引物等重復(fù)實(shí)驗(yàn);反應(yīng)體系在超凈工作臺(tái)內(nèi)配制,減少氣溶膠污染。
2、引物設(shè)計(jì)不合理:重新設(shè)計(jì)并合成引物。
產(chǎn)品名稱:紅榮微再 HS Probe qPCR預(yù)混試劑
產(chǎn)品貨號(hào):RF-Q3001
關(guān)于公司:
紅榮微再作為RNA、NGS、ctDNA、qPCR的分子診斷專業(yè)供應(yīng)商,以“傳遞科學(xué)價(jià)值,服務(wù)科學(xué)研究"為宗旨,努力為客戶提供質(zhì)量可靠、貨美價(jià)優(yōu)的分子診斷試劑耗材,與客戶攜手為中國分子診斷的發(fā)展而前行。
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