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TAKARA RetroNectin 重組人纖維蛋白,296

  • 型   號:T100B
  • 價   格:

TAKARA RetroNectin 重組人纖維蛋白,296:
RetroNectin®是在大腸桿菌中產生的重組人纖維蛋白片段FN CH-296。 當包被在培養(yǎng)瓶和培養(yǎng)板表面時,RetroNectin®能顯著增強逆轉錄病毒介導的基因轉移到哺乳動物細胞中。
RetroNectin®重組人纖維蛋白片段和激發(fā)型CD3單抗協同作用可以刺激T細胞擴增。

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產品英文名:TAKARA RetroNectin®(Recombinant Human Fibronectin Fragment),FN CH-296

產品中文名:TAKARA RetroNectin®重組人纖維蛋白片段,FN CH-296


RetroNectin® 重組人纖維蛋白片段

RetroNectin®是在大腸桿菌中產生的重組人纖維蛋白片段FN CH-296。 當包被在培養(yǎng)瓶培養(yǎng)板表面時,RetroNectin®能顯著增強逆轉錄病毒介導的基因轉移到哺乳動物細胞中。

RetroNectin®重組人纖維蛋白片段和激發(fā)型CD3單抗可分別與T淋巴細胞上的VLA和TCR結合,兩者共同作用激活酪-氨酸激酶pp125FAK,通過Ras途徑刺激T細胞的增殖和分化,使其獲得上千倍的增殖。


組份

RetroNectin (Recombinant Human Fibronectin Fragment) 0.5 mg (Cat. #T100A)

RetroNectin (Recombinant Human Fibronectin Fragment) 2.5 mg (Cat. #T100B)

RetroNectin is provided as a sterile 1 mg/ml solution.

[Form] Sterile solution containing 12.5 mM sodium citrate (pH 6.2) and 1.25% sucrose


儲存

-20℃

Caution: Freezing and thawing can be repeated up to 10 times


品牌

貨號

產品描述

包裝

TAKARA

T100B

RetroNectin® Recombinant Human Fibronectin Fragment

重組人纖維蛋白片段

2.5mg

TAKARA

T100A

0.5mg

TAKARA

T201

RetroNectin® Recombinant Human Fibronectin Fragment

重組人纖維蛋白片段,GMP級

2.5 mg 凍干粉


*


品牌

貨號

產品描述

包裝

TAKARA

GT-T551 H3

淋巴細胞、DC細胞、NK細胞無血清培養(yǎng)基

1000 ml


訂購RetroNectin歡迎您咨詢華雅再生醫(yī)學旗艦公司:紅榮微再(上海)生物工程技術有限公司 。紅榮微再授權代理TAKARA CellArtis ,Rubicon產品。紅榮微再(上海)生物工程技術有限公司以“傳遞科學價值,服務科學研究"為宗旨,主營干細胞、精準醫(yī)療、細胞治療、器官再生四大板塊的產品。


RetroNectin原理

RetroNectin是重組人纖維蛋白片段FN CH-296,包括細胞結合域,肝磷脂結合域和CS1位點三個功能區(qū)域。它由574個氨基酸組成,分子量63 kDa。RetroNectin能夠大幅地提高逆轉錄病毒感染哺乳動物細胞的感染效率,其作用原理是:細胞表面VLA-4及VLA-5可分別與RetroNectin上的CS-1位點及細胞結合域結合,逆轉錄病毒載體可以與肝磷脂結合域結合。在經RetroNectin包被的培養(yǎng)容器表面,細胞與病毒載體以高濃度共存,從而提高基因轉染效率。RetroNectin®重組人纖維蛋白片段和激發(fā)型CD3單抗可分別與T淋巴細胞上的VLA和TCR結合,兩者共同作用激活酪-氨-酸激酶pp125FAK,通過Ras途徑刺激T細胞的增殖和分化,使其獲得上千倍的增殖。


RetroNectin逆轉錄技術操作流程

RetroNectin技術可以顯著提高逆轉錄病毒的轉染效率,這一發(fā)現克服了向造血干細胞中導入基因的困難。現在,RetroNectin技術已成為使用逆轉錄病毒進行轉染操作的常規(guī)選擇,其操作流程大致如下:


1. 注射用水或滅菌蒸餾水充分溶解RetroNectin,調節(jié)濃度至1mg/ml。

2. 0.22 μm濾膜過濾RetroNectin溶液,分裝后-20 ℃保存。

3. 用緩沖液將RetroNectin溶液稀釋至20~100 μg/ml。

4. 將RetroNectin稀釋液加入24孔板,每孔0.5 ml (建議用PBS緩沖液稀釋RetroNectin后包被Non-Tissue Cluture Treated plate。

5. 室溫放置4小時或4 ℃,避光,過夜。

6. 吸出RetroNectin溶液,每孔加入PBS終止液0.5 ml。

7. 室溫放置30分鐘。

8. 加入適量PBS清洗孔板。

9. 吸出清洗液,得到RetroNectin包被的孔板 (如果暫不使用,可以在孔中加入適量PBS,用膠膜將平板蓋密封,避免RetroNectin干燥,可于4 ℃保存4周。使用前將PBS吸出) 。

10. 逆轉錄病毒保存液 (-80 ℃) 于37 ℃水浴融解。

11. 將病毒液加入包被后的24孔板,每孔300 μl。

12. 32 ℃放置4小時。

13. 吸出病毒保存液。

14. 每孔加入待轉染的細胞懸液400 μl (通常細胞濃度為1 × 105/ml) 。


RetroNectin增強T細胞擴增技術流程


T-cell expansion protocol using RetroNectin reagent, GT-T551 T-cell medium, CultiLife bags, and anti-CD3 mAb.


1.  RetroNectin和CD3單克隆抗體包被培養(yǎng)袋。

2.  同時,來自PBMC的T細胞用GT-T551培養(yǎng)基+IL-2+血漿培養(yǎng)。

3. 第4天,T細胞轉移到培養(yǎng)袋,繼續(xù)用GT-T551培養(yǎng)基+IL-2+血漿培養(yǎng)。

4. 第7天,添加更多GT-T551培養(yǎng)基+IL-2。

5. 第10天,分裝兩個培養(yǎng)袋,添加更多GT-T551培養(yǎng)基+IL-2。




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