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本篇告訴你如何使用人外周血淋巴細(xì)胞分離液
更新時(shí)間:2022-01-12 點(diǎn)擊次數(shù):868次
人外周血淋巴細(xì)胞分離液為帶有乳光或微乳光的滅菌水溶液。主要成分是Ficoll 400與泛影酸葡甲胺。適用于從血液分離所需細(xì)胞,在醫(yī)療和醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究中廣泛應(yīng)用。
其他人及動物多種比重細(xì)胞分離液。注:因不同種屬不同比重分離液的細(xì)胞離散系數(shù)及細(xì)胞帶電不同,所以用戶在定制分離液時(shí)應(yīng)提供所需分離液的比重、動物的種屬及被分離細(xì)胞的名稱。
下面讓我們一起來了解一下人外周血淋巴細(xì)胞分離液的使用方法與注意事項(xiàng)吧
取新鮮抗凝血1ml,與全血及組織勻漿稀釋液(Cat#:2010C1119)液1:1 混勻后,小心加于2ml的細(xì)胞分離液之液面上,以1500-2000轉(zhuǎn)/分離心(半徑15cm水平轉(zhuǎn)子)15分鐘,此時(shí)離心管中由上至下細(xì)胞分四層。
一層;為血漿層。
第二層;為環(huán)狀乳白色淋巴細(xì)胞。
第三層;為透明分離液層。
第四層;為紅細(xì)胞層,收集第二層細(xì)胞放入含細(xì)胞洗滌液(Cat#:2010X1118)4-5毫升的試管中,充分混勻后,以1500-2000轉(zhuǎn)/分離心10-30分鐘。沉淀經(jīng)反復(fù)洗2次即得所需細(xì)胞。(此方法效果較好,推薦使用)
注意事項(xiàng)
1. 啟封后應(yīng)置4℃保存避免微生物的污染。
2. 細(xì)胞分離液從冰箱取出后,不可立即使用,需待溶液溫度升至室溫時(shí),搖勻后使用。
3. 整個(gè)分離過程中,溫度應(yīng)控制在18-28℃且在無菌環(huán)境下,避免微生物的污染,否則會影響分離質(zhì)量。
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