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如何避免或減少重組蛋白發(fā)酵表達過程中包涵體的形成
更新時間：2021-06-18 點擊次數(shù)：1539次
重組蛋白表達過程中，包涵體的形成使后續(xù)活性蛋白的收率降低，并且包涵體的復性及純化過程復雜，難度大。那么如何避免或減少重組蛋白發(fā)酵表達過程中包涵體的形成呢?
表達調(diào)控
包涵體的形成，主要原因是表達速率過快，過量表達導致蛋白堆積而成。那么通過降低重組蛋白的表達速率來減少或抑制包涵體的形成，可以嘗試低溫誘導等方式減少包涵體的形成。
優(yōu)化序列
蛋白序列中含硫氨基酸增多及脯氨酸的數(shù)量增多，更容易形成包涵體，含硫氨基酸數(shù)量多，二硫鍵若不能正確配對極易形成包涵體，而脯氨酸是D型氨基酸，常需要異構(gòu)酶輔助折疊。所以可以通過定點突變等方式來降低含硫氨基酸和脯氨酸的數(shù)量從而減少包涵體的形成。
共表達
在蛋白序列上連接一段可溶性表達的序列，來改變蛋白的氨基酸組成及各種氨基酸占的比例，也可以有效避免或減少包涵體的形成，比如加GST標簽有一定的促溶作用。
環(huán)境調(diào)控
蛋白所處環(huán)境也會影響其形成包涵體，比如細胞內(nèi)的環(huán)境pH接近蛋白的pI時也容易形成包涵體，還有滲透壓也會影響細胞內(nèi)的疏水作用力，也會對蛋白的折疊積累形成影響，那么減少或避免包涵體的形成可以嘗試改變發(fā)酵過程中的pH和培養(yǎng)基中鹽的種類及濃度，來避免或減少包涵體的形成。
以上內(nèi)容便是本次為大家分享關于重組蛋白的相關信息，希望大家在看完之后能夠?qū)υ摦a(chǎn)品有更多的了解。
