心肌分化試劑盒包含有多肽類分化因子和涉及心肌細(xì)胞分化關(guān)鍵信號通路的調(diào)控因子的無血清培養(yǎng)基。在對人ESCs和iPSC不同細(xì)胞系的實驗中，本試劑盒能得到心肌細(xì)胞分化效率比所有已發(fā)表方法都高的結(jié)果。
心肌分化試劑盒的特點主要有以下幾點：
1.單層培養(yǎng)，均質(zhì)分化
2.多細(xì)胞系可重復(fù)性好
3.跳動層細(xì)胞7天即可觀察
4.誘導(dǎo)分化程序簡單便捷
心肌分化試劑盒的凍存方法：
1、如果需要將心肌細(xì)胞長期保存，可對心肌細(xì)胞進(jìn)行凍存，凍存操作會導(dǎo)致40%左右的細(xì)胞死亡。
2、37℃水浴預(yù)熱PBS溶液和Accutase傳代工作液，4℃預(yù)冷心肌分化試劑盒。
3、吸走心肌維持培養(yǎng)基，并且加入PBS溶液洗一次。
4、加入Accutase傳代工作液使之*覆蓋皿/瓶底。
5、37℃孵育15-20分鐘，顯微鏡下觀察到大部分細(xì)胞相互分離，表面細(xì)胞消化時間理想。
6、用槍扇形吹打培養(yǎng)皿/瓶底，使皿/瓶底貼附的心肌細(xì)胞脫落，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，再向皿/瓶中加入適量PBS溶液潤洗皿/瓶底，收集剩余細(xì)胞加入15ml離心管中。(注：吹打力度要輕柔，避免損傷心肌細(xì)胞)
7、200g離心5分鐘。棄去上清，用重懸細(xì)胞，輕柔吹打混勻。
8、按復(fù)蘇所需要的量，1ml每管凍存。
9、以1℃每分鐘的速率降至-80℃過夜(一般常見商品化凍存盒均可提供此條件)。
10、-80℃過夜后，將凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)移至液氮保存。
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