那么下面我們就來分享一下無血清凍存液的使用方法,一起來看看吧。
一、凍存液成分
無血清細(xì)胞,無血清干細(xì)胞及MSC凍存液
無血清凍存液的保存條件
儲(chǔ)存于4℃以下。質(zhì)量保障期從產(chǎn)品的生產(chǎn)日期起,為期3年。3個(gè)月以上沒有使用凍存液計(jì)劃時(shí),盡可能冷凍保存。為避免重復(fù)凍融過程可能導(dǎo)致的凍存液品質(zhì)下降和性能降低,推薦將100 ml產(chǎn)品分裝小瓶后,再存放于4℃以下或-20℃冰箱凍存。
二、無血清凍存液的使用方法
選擇凍存處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞有助于提高復(fù)蘇細(xì)胞存活率。
1.按照常用方法收集懸浮細(xì)胞或貼壁細(xì)胞于試管中。
2.按照培養(yǎng)細(xì)胞密度和所用細(xì)胞凍存管的尺寸計(jì)算所需凍存細(xì)胞數(shù)。
(參考:5×105至5×106 cells/ml)。
3.取相當(dāng)于所需細(xì)胞數(shù)的細(xì)胞懸浮液量,置于離心管中,離心收集培養(yǎng)細(xì)胞(參考離心條件:1,000~2,000 rpm,4℃,3~5 min)。移去離心管中的上清液。
4.加入適量的無血清型細(xì)胞凍存液于離心管中,使細(xì)胞濃度為5×105至5×106 cells/ml。緩慢地混合均勻,制成細(xì)胞混合液。
5.將離心管中的細(xì)胞混合液分裝于已標(biāo)示*的冷凍保存管中。
6.直接將含細(xì)胞混合液的凍存管放入-80℃冰箱,長(zhǎng)期冷凍保存。
7.若研究者需要液氮保存時(shí),可將*凍結(jié)的凍存管(放入-80℃冰箱后至少一晝夜)移至-196℃液氮罐。